Primeras pruebas de detección en laboratorio
Los resultados de las pruebas de detección del PT y del aPTT pueden
interpretarse juntos para identificar y excluir algunos trastornos de
la coagulación. Si el PT es normal, se excluyen las deficiencias de
las vías de coagulación extrínseca y común (es decir., FV, FVIII, FIX, FX,
FXI or FXII). Un PT prolongado aislado sugiere inmediatamente una
deficiencia del FVII. La prolongación del índice normalizado
internacional (INR) puede depender
del nivel de FVII en el plasma. Además de las lesiones genéticas,
puede haber otros factores que influencien el nivel de actividad del
FVII como la enfermedad hepática, una deficiencia de vitamina K o un
tratamiento con antagonistas de la vitamina K.1,2 No todos
los reactivos detectan todos los defectos moleculares del FVII, es por
ello que el PT puede ser normal con un reactivo pero anormal con otro.
En este caso, los resultados obtenidos con reactivos con factor
tisular (TF) humano
tienen más probabilidades de correlacionarse con el panorama clínico.
Pruebas de actividad de un factor
El FVII activado (FVIIa) está presente en el plasma con una
concentración de 5–15 ng/mL en individuos normales, lo que representa
alrededor de 1–3% del pool total de FVII, con una vida media de 2 a 3
horas. Las pruebas de actividad del FVII sirven para confirmar la
falta de actividad del FVII/FVIIa. Una prueba coagulométrica utiliza
un TF soluble truncado (TFF) recombinante que no puede activar el
zimógeno FVII y, por lo tanto, mide la actividad del FVIIa en una
muestra dada. La misma prueba también puede utilizarse para medir la
generación de trombina o la actividad del FXa usando sustratos
fluorogénicos. Una prueba fluorogénica separada, que también utiliza
un sustrato fluorogénico basado en el FXa, activa el FVII a FVIIa y
luego mide la actividad total. Así, se pueden esclarecer entonces las
proporciones relativas del FVII activado y zimógeno juntas.2,3
La elección de los reactivos para las pruebas para medir la
actividad del FVII en base a la prueba de coagulación es fundamental
ya que el origen de la tromboplastina utilizada en la prueba puede
afectar los resultados. Además, las cantidades residuales de actividad
del FVII en un plasma deficitario en factor pueden reducir la
sensibilidad de las pruebas en el rango de baja actividad. La
calibración de la prueba con un estándar de plasma y la introducción
de TF recombinante y preparaciones de fosfolípidos sintéticos han
reducido la variabilidad entre laboratorios relacionada con estos componentes.1-3
Análisis molecular (genotipificación)
El análisis genético molecular del gen del FVII (F7)
representa la norma de oro para confirmar un diagnóstico de FVII CD.
En la mayoría de los casos, una secuencia de F7 completa luego
de una amplificación por PCR convencional
identifica la lesión genética. El análisis también resulta útil en
presencia de un fenotipo hemorrágico o actividad del FVII discordante
o un patrón de herencia confuso. También es posible realizar un
diagnóstico prenatal mediante la sangre del cordón umbilical en
presencia de antecedentes familiares o hemorragias.1
Pruebas inmunológicas de antígenos del FVII
Las deficiencias basadas en la activación del zimógeno se
pueden confirmar o excluir con un ensayo inmunoenzimático (ELISA) para el
FVII disponible a fin de distinguir entre el zimógeno FVII y el FVIIa.
